नवीन कोरोनाव्हायरस (SARS-Cov-2) न्यूक्लिक ॲसिड डिटेक्शन किट
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluधातूscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】नवीन कोरोनाव्हायरस (SARS-Cov-2) न्यूक्लिक ॲसिड डिटेक्शन किट (फ्लोरोसंट आरटी-पीसीआर प्रोब पद्धत)
【Packaging specifications 】25 चाचण्या/किट
【Intended usवय】
या किटचा वापर नॅसोफॅरिंजियल स्वॅब्स, ऑरोफॅरिंजियल (घसा) स्वॅब्स, अँटीरियर नेसल स्वॅब्स, मिड-टर्बिनेट स्वॅब्स, नॅसल वॉश आणि नॅसल एस्पिरेट्समध्ये नवीन कोरोनाव्हायरसपासून न्यूक्लिक ॲसिडच्या गुणात्मक तपासणीसाठी केला जातो ज्यांना COVID19 द्वारे आरोग्य सेवा प्रदान केल्याचा संशय आहे. नवीन कोरोनाव्हायरसच्या ORF1ab आणि N जनुकांचा शोध सहाय्यक निदान आणि नवीन कोरोनाव्हायरस संसर्गाच्या महामारीविज्ञान निरीक्षणासाठी वापरला जाऊ शकतो.
【Principles of the procedure 】
हे किट विशिष्ट TaqMan प्रोब आणि नॉव्हेल कोरोनाव्हायरस (SARS-Cov-2) ORF1ab आणि N जनुक अनुक्रमांसाठी डिझाइन केलेल्या विशिष्ट प्राइमर्ससाठी डिझाइन केलेले आहे. PCR प्रतिक्रिया सोल्यूशनमध्ये विशिष्ट लक्ष्य शोधण्यासाठी विशिष्ट प्राइमर्स आणि फ्लोरोसेंट प्रोबचे 3 संच असतात आणि अंतर्जात हाउसकीपिंग जीन्स शोधण्यासाठी किटचे अंतर्गत मानक नियंत्रण म्हणून विशिष्ट प्राइमर्स आणि फ्लोरोसेंट प्रोबचा अतिरिक्त संच वापरला जातो.
चाचणीचे तत्त्व असे आहे की विशिष्ट फ्लोरोसेंट प्रोब पीसीआर प्रतिक्रियेतील टाक एन्झाइमच्या एक्सोन्यूक्लीझ क्रियाकलापाने पचले जाते आणि खराब केले जाते, ज्यामुळे रिपोर्टर फ्लोरोसेंट गट आणि शमन फ्लोरोसेंट गट वेगळे केले जातात, ज्यामुळे फ्लोरोसेंट मॉनिटरिंग सिस्टम फ्लोरोसेंट प्राप्त करू शकते. सिग्नल, आणि नंतर पीसीआर ॲम्प्लीफिकेशनच्या समृद्धी प्रभावाद्वारे, प्रोबचा फ्लूरोसेन्स सिग्नल सेट थ्रेशोल्ड व्हॅल्यू-सीटी व्हॅल्यू (सायकल थ्रेशोल्ड) पर्यंत पोहोचतो. टार्गेट ॲम्प्लिकॉन नसताना, प्रोबचा रिपोर्टर ग्रुप क्वेंचिंग ग्रुपच्या जवळ असतो. यावेळी, फ्लोरोसेन्स रेझोनान्स एनर्जी ट्रान्सफर होते आणि रिपोर्टर ग्रुपचा फ्लूरोसेन्स क्वेन्चिंग ग्रुपद्वारे शमन केला जातो, ज्यामुळे फ्लोरोसेंट पीसीआर इन्स्ट्रुमेंटद्वारे फ्लोरोसेंट सिग्नल शोधला जाऊ शकत नाही.
चाचणी दरम्यान अभिकर्मकांच्या वापरावर लक्ष ठेवण्यासाठी, किट सकारात्मक आणि नकारात्मक नियंत्रणांसह सुसज्ज आहे: सकारात्मक नियंत्रणामध्ये लक्ष्य साइट रीकॉम्बीनंट प्लाझमिड आहे आणि नकारात्मक नियंत्रण डिस्टिल्ड वॉटर आहे, जे पर्यावरणीय प्रदूषणाचे निरीक्षण करण्यासाठी वापरले जाते. चाचणी करताना एकाच वेळी सकारात्मक नियंत्रण आणि नकारात्मक नियंत्रण सेट करण्याची शिफारस केली जाते.
【Main comपोनेनts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | कॉम्पोनents | |
| नमe | तपशीलीकरण | क्वांटity | क्वांटity | |
| सकारात्मक नियंत्रण | 180 μL/कुपी | 1 | 1 | कृत्रिमरित्या तयार केलेले प्लास्मिड्स, डिस्टिल्ड वॉटर |
| नकारात्मक नियंत्रण | 180 μL/कुपी | 1 | 1 | डिस्टिल्ड पाणी |
| SARS-Cov-2 मिक्स | 358.5 μL/कुपी | 1 | / | विशिष्ट प्राइमर जोड्या, विशिष्ट डिटेक्शन फ्लोरोसेंट प्रोब, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, डिस्टिल्ड वॉटर इ. |
| एन्झाइम मिक्स | 16.5 μL/कुपी | 1 | / | Taq enzymes, reverse transscriptase, UNG enzymes, इ. |
| SARS-Cov-2 मिक्स (ल्योफिलाइज्ड) | 25 चाचण्या/कुपी | / | 1 | विशिष्ट प्राइमर जोड्या, विशिष्ट डिटेक्शन फ्लोरोसेंट प्रोब, dNTPs, Taq एन्झाईम्स, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस, डिस्टिल्ड वॉटर इ. |
| 2x बफर | 375 μL/कुपी | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, डिस्टिल्ड वॉटर इ. |
नोंद:(1) वेगवेगळ्या बॅच किटमधील घटक मिसळले किंवा बदलले जाऊ शकत नाहीत.
(२) तुमचा स्वतःचा अभिकर्मक तयार करा: न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन किट.
【Storage conditions आणि expiration date 】
For BST-SARS-25:-20±5℃ वर बराच काळ वाहतूक आणि स्टोअर करा.
For BST-SARS-DR-25:खोलीच्या तपमानावर वाहतूक. -20±5℃ वर जास्त काळ साठवा.
वारंवार फ्रीझ-थॉ सायकल टाळा. वैधता कालावधी तात्पुरता 12 महिन्यांसाठी सेट केला आहे.
उत्पादन आणि वापराच्या तारखेसाठी लेबल पहा.
प्रथम उघडल्यानंतर, अभिकर्मक -20±5 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 1 महिन्यापेक्षा जास्त काळ किंवा अभिकर्मक कालावधी संपेपर्यंत साठवले जाऊ शकते, जी तारीख आधी येईल, वारंवार फ्रीझ-थॉ चक्र टाळण्यासाठी आणि अभिकर्मक फ्रीझची संख्या. -थॉ सायकल 6 वेळा पेक्षा जास्त नसावी.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.लागू नमुना प्रकार: काढलेले न्यूक्लिक ॲसिड द्रावण.
2.नमुना साठवण आणि वाहतूक: 6 महिन्यांसाठी -20±5℃ वर साठवा. नमुने 6 पेक्षा जास्त वेळा गोठवा आणि वितळवू नका.
【Tअंदाजing method】
1.Nucleic acid extraction
व्हायरल न्यूक्लिक ॲसिड काढण्यासाठी योग्य न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन किट निवडा आणि संबंधित किटच्या सूचनांचे पालन करा. Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. किंवा समतुल्य न्यूक्लिक ॲसिड शुद्धीकरण किट द्वारे निर्मित न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन आणि शुध्दीकरण किट वापरण्याची शिफारस केली जाते.
2. Reaction reagent prepआराtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 मिक्स आणि एन्झाईम मिक्स काढून टाका, खोलीच्या तापमानाला पूर्णपणे वितळवून घ्या, व्होर्टेक्स यंत्राद्वारे पूर्णपणे मिसळा आणि नंतर थोडक्यात सेंट्रीफ्यूज करा.
(2) 358.5uL SARS-Cov-2 मिक्समध्ये 16.5uL एन्झाइम मिक्स जोडले गेले आणि मिश्र प्रतिक्रिया समाधान मिळविण्यासाठी पूर्णपणे मिसळले.
(3) स्वच्छ 0.2 mL पीसीआर ऑक्टल ट्यूब तयार करा आणि वरील विहिरीतील 15uL मिश्र प्रतिक्रिया द्रावणाने चिन्हांकित करा.
(4) 15 μL शुद्ध केलेले न्यूक्लिक ॲसिड द्रावण, सकारात्मक नियंत्रण आणि नकारात्मक नियंत्रण जोडा आणि ऑक्टल ट्यूब कॅप काळजीपूर्वक झाकून टाका.
(५) उलटे उलटे करून चांगले मिसळा आणि ट्यूबच्या तळाशी द्रव एकाग्र करण्यासाठी पटकन सेंट्रीफ्यूज करा.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) प्रतिक्रिया मिश्रण तयार करण्यासाठी SARS-Cov-2 मिक्स((Lyophilised) मध्ये 375ul 2x बफर जोडा. पाइपिंगद्वारे पूर्णपणे मिसळा आणि नंतर थोडक्यात सेंट्रीफ्यूज करा. दीर्घकालीन स्टोरेज.)
(2) स्वच्छ 0.2 mL PCR ऑक्टल ट्यूब तयार करा आणि त्यावर 15μL प्रतिक्रिया मिश्रण प्रति विहिरीसह चिन्हांकित करा.
(3) 15μL शुद्ध केलेले न्यूक्लिक ॲसिड द्रावण, सकारात्मक नियंत्रण आणि नकारात्मक नियंत्रण जोडा आणि अष्टक ट्यूब कॅप काळजीपूर्वक झाकून टाका.
(४) उलटे उलटे करून चांगले मिसळा आणि ट्यूबच्या तळाशी द्रव एकाग्र करण्यासाठी पटकन सेंट्रीफ्यूज करा.
3. पीसीआर amplification (ऑपरेशन सेटिंग्जसाठी कृपया इन्स्ट्रुमेंट मॅन्युअल पहा.)
3. 1 फ्लोरोसेंट पीसीआर उपकरणाच्या नमुना चेंबरमध्ये पीसीआर 8-ट्यूब ठेवा आणि चाचणीसाठी नमुना सेट करा, लोडिंगच्या क्रमानुसार सकारात्मक नियंत्रण आणि नकारात्मक नियंत्रण.
3.2 फ्लूरोसेन्स डिटेक्शन चॅनेल:
(1) ORF1ab जनुक FAM चे शोध चॅनेल निवडते (रिपोर्टर: FAM, Quencher: None).
(2) N जनुक VIC चे डिटेक्शन चॅनेल निवडते (रिपोर्टर: VIC, Quencher: None).
(३) अंतर्गत मानक जनुक CY5 चे डिटेक्शन चॅनेल निवडते (रिपोर्टर: CY5, Quencher: None).
(4) निष्क्रिय संदर्भ ROX वर सेट केला आहे.
3.3 PCR प्रोग्राम पॅरामीटर सेटिंग:
| पायरी | तापमान (℃) | वेळ | चक्रांची संख्या | |
| 1 | उलट प्रतिलेखन प्रतिक्रिया | 50 | १५ मि | 1 |
| 2 | Taq एंजाइम सक्रियकरण | 95 | 2.5 मि | 1 |
| 3 | Taq एंजाइम सक्रियकरण | 93 | 10 से | 43 |
| एनीलिंग विस्तार आणि प्रतिदीप्ति संपादन | 55 | 30 से | ||
सेट केल्यानंतर, फाईल सेव्ह करा आणि प्रतिक्रिया प्रोग्राम चालवा..
4.Results analysis
कार्यक्रम संपल्यानंतर, परिणाम आपोआप जतन केले जातात, आणि प्रवर्धन वक्र विश्लेषण केले जाते. प्रवर्धन वक्र इन्स्ट्रुमेंट डीफॉल्ट थ्रेशोल्डवर सेट केले आहे.
【Explanation of test results 】
1. प्रयोगाची वैधता निश्चित करा: सकारात्मक नियंत्रण FAM, VIC चॅनेलमध्ये विशिष्ट प्रवर्धन वक्र असणे आवश्यक आहे आणि Ct मूल्य साधारणपणे 34 पेक्षा कमी आहे, परंतु भिन्न साधनांच्या भिन्न थ्रेशोल्ड सेटिंग्जमुळे ते चढ-उतार होऊ शकते. नकारात्मक नियंत्रण FAM, VIC चॅनेल नॉन-एम्प्लीफाइड Ct असावे. हे मान्य आहे की वरील आवश्यकता एकाच वेळी पूर्ण केल्या पाहिजेत, अन्यथा ही चाचणी अवैध आहे.
2. निकालाचा निर्णय
| FAM/VIC चॅनेल | निकालाचा निकाल |
| सीटी - 37 | नमुना चाचणी सकारात्मक आहे |
| 37≤Ct＜40 | प्रवर्धन वक्र एस-आकाराचे आहे, आणि संशयास्पद नमुन्यांची पुन्हा तपासणी करणे आवश्यक आहे; जर पुनर्परीक्षेचे निकाल सुसंगत असतील तर ते सकारात्मक मानले जाते, अन्यथा ते नकारात्मक असते |
| Ct≥40 किंवा कोणतेही प्रवर्धन नाही | नमुना चाचणी नकारात्मक आहे (किंवा किट शोधण्याच्या खालच्या मर्यादेपेक्षा कमी) |
टीप: (१) FAM चॅनल आणि VIC चॅनल दोन्ही एकाच वेळी सकारात्मक असल्यास, SARS-Cov-2 सकारात्मक असल्याचे निश्चित केले जाते.
(2) जर FAM चॅनल किंवा VIC चॅनल पॉझिटिव्ह असेल आणि इतर चॅनल नकारात्मक असेल तर चाचणीची पुनरावृत्ती करावी. जर ते एकाच वेळी सकारात्मक असेल, तर ते SARS-Cov-2 पॉझिटिव्ह म्हणून ठरवले जाईल, अन्यथा ते SARS-Cov-2 निगेटिव्ह म्हणून ठरवले जाईल.
संबंधित उत्पादने
-
COVID-19 IgM/IgG अँटीबॉडी डिटेक्शन किट
COVID-19 IgM/IgG अँटीबॉडी डिटेक्शन किट （कोलॉइडल गोल्ड इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी पद्धत) उत्पादन मॅन्युअल 【उत्पादनाचे नाव】COVID- 19 IgM/IgG अँटीबॉडी डिटेक्शन किट 【कोलॉइडल गोल्ड इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी चाचणी, 【ECIFKITS/1SPKAGS 【 गोषवारा】 नवीन कोरोनाव्हायरस β वंशातील आहेत. कोविड-19 हा एक तीव्र श्वसन संसर्गजन्य रोग आहे. लोक सहसा संवेदनाक्षम असतात. सध्या, कोरोनाव्हायरस या कादंबरीने संक्रमित रुग्ण हे मुख्य स्त्रोत आहेत ...
-
न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन किंवा प्युरिफिकेशन किट
न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन किंवा प्युरिफिकेशन किट किंवा -20℃ वर संग्रहित. नमुना 0℃ कर्लिंग वापरून वाहतूक करणे आवश्यक आहे. परिचय न्यूक्लिक ॲसिड एक्स्ट्रॅक्शन किंवा प्युरिफिकेशन किट (मॅग्नेटिक बीड्स मेथड) स्वयंचलित न्यूक्लिक ॲसिड काढण्याच्या साधनांचा वापर करून शरीरातील द्रव (जसे की स्वॅब्स, प्लाझ्मा, सीरम) पासून RNA आणि DNA च्या स्वयंचलित शुद्धीकरणासाठी डिझाइन केले आहे. चुंबकीय-कण तंत्रज्ञान उच्च-गुणवत्तेचे डीएनए/आरएनए प्रदान करते जे यासाठी योग्य आहे ...
-
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (इम्युनोक्रोमॅटोग्रा...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी पद्धत) उत्पादन मॅन्युअल 【PRODUCT NAME】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी पद्धत) 【पॅकेजिंग स्पेसिफिकेशन्स】 1 टेस्ट/किट कोरोनाव्हायरसशी संबंधित आहे. कोविड-19 हा एक तीव्र श्वसन संसर्गजन्य रोग आहे. लोक सहसा संवेदनाक्षम असतात. सध्या, कोरोनाव्हायरस या कादंबरीने संक्रमित रुग्ण हे मुख्य आहेत ...
-
SARS-CoV-2 अँटीजेन ऍसे किट
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी पद्धत) उत्पादन मॅन्युअल 【PRODUCT NAME】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमॅटोग्राफी पद्धत) 【पॅकेजिंग स्पेसिफिकेशन】 1 टेस्ट/किट, 1टीटीटीटीएबीटी ,2एसटीटीएबीटी 1 टेस्ट 】 द नवीन कोरोनाव्हायरस β वंशातील आहेत. कोविड-19 हा एक तीव्र श्वसन संसर्गजन्य रोग आहे. लोक सहसा संवेदनाक्षम असतात. सध्या, कोरोनाव्हायरस या कादंबरीने संक्रमित रुग्ण हे संक्रमणाचे मुख्य स्त्रोत आहेत; लक्षणे नसलेले संक्रमित लोक...